A nátrium-citrát puffert gyakran használják az RNS izolálására, mivel ez minimálisra csökkenti az RNS szálak bázisos hidrolízisét, és felbecsülhetetlen értékűvé teszi az mRNS tisztítását genomi kutatás és transzkripció tanulmányozása. A citrát alapú pufferek elősegítik az antigének kimutatását a rögzített szöveti készítményekben is, mivel megbontják az antigének és a rögzítő közeg között kialakult keresztkötéseket.
A következő egyszerű lépésekkel 10 perc alatt elkészíthetünk egy nátrium-citrát-puffert, amelynek pH-ja 6 (savas).
Anyagok a nátrium-citrát pufferhez
Kevés anyag szükséges a nátrium-citrát-puffer előállításához. A citromsavval csak 1 mól nátrium-hidroxid, desztillált víz és kalibrált pH-szonda szükséges. A nátrium-citrát választható.
A puffer elkészítéséhez 1 liter mérõhenger, 1 literes mérõlombik és három 1 literes médiapalack szükséges. Végül szükséged lesz egy mágneses keverőrudakra és egy mágneses keverőre. Ezek az anyagok megtalálhatók az iskolában, munkahelyi laboratóriumok vagy online vagy speciális áruházakban vásárolhatók meg.
Két lehetőség a puffer készítéséhez
Kétféle módszer áll rendelkezésre a nátrium-citrát puffer készítésére, az elérhető anyagoktól függően.
- Ha mind citromsav, mind a konjugált bázis rendelkezik, készítsen mindegyik törzsoldatot 21 gramm keverésével citromsav 1 liter desztillált vízben és 29,4 gramm nátrium-citrát 1 liter desztillált vízben víz.
- Ha csak citromsav van kéznél, keverjen össze 2,1 gramm kevesebb, mint 1 liter desztillált vizet.
Citromsav és nátrium-citrát oldatok keverése
Keverje össze 82 ml citromsav oldatot 18 milliliter nátrium-citrát oldattal. Ehhez adjunk hozzá annyi desztillált vizet, hogy a keverék térfogata kissé kevesebb mint 1 liter legyen.
A pH beállítása
Az oldatot mágneses keverővel óvatosan keverve 1 mol / l-es nátrium-hidroxid-oldattal állítsa be az elegy pH-ját 6,0-ra. Ezután mérőlombikkal adjunk hozzá további desztillált vizet, hogy az oldat végső teljes térfogata pontosan 1-re emelkedjen liter.